一、細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念

    體外培養(yǎng)（in vitro culture）包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng)，即：組織培養(yǎng)（tissue culture）、細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）和器官培養(yǎng)（organ culture）。

細(xì)胞培養(yǎng)(Cell culture)指從生物機(jī)體取出部分組織分散成單個(gè)細(xì)胞或直接從機(jī)體取出單個(gè)細(xì)胞，也可把體外培養(yǎng)細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞在體外條件下培養(yǎng)，細(xì)胞能繼續(xù)存活與增殖。

二、細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途

1、科學(xué)研究

（1）藥物研究開(kāi)發(fā)，如新藥篩選，疫苗、基因工程藥物、細(xì)胞工程藥物研究與開(kāi)發(fā)、單克隆抗體制備等。

（2）基礎(chǔ)研究，如藥物作用機(jī)理、基因功能、疾病發(fā)生機(jī)理等研究。

2、生物制藥

（1）疫苗生產(chǎn)：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)，多肽疫苗（腫瘤疫苗)等。

（2）基因工程藥物生產(chǎn)：如EPO等。

（3）抗體藥物、基因治療藥物生產(chǎn)。

（4）細(xì)胞工程藥物生產(chǎn)：生物細(xì)胞內(nèi)的一些生物活性多肽，生物活性物質(zhì)等。

（5）利用細(xì)胞法體外測(cè)定生物活性物質(zhì)的活性；并預(yù)測(cè)其在體內(nèi)的藥效和替代體內(nèi)法檢測(cè)其成品的生物活性。

三、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)

      原代培養(yǎng)（primary culture）:將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖，這一過(guò)程稱(chēng)原代培養(yǎng)。

但實(shí)際上，通常把第yi代至第十代以?xún)?nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。

傳代培養(yǎng)（subculture）：細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長(zhǎng)一定時(shí)間后，被分開(kāi)接種到新的培養(yǎng)器皿中。

    當(dāng)原代培養(yǎng)*以后，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂，一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長(zhǎng)速度減慢甚至停止；另一方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)。

對(duì)單層培養(yǎng)而言，80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段。

四、體外培養(yǎng)細(xì)胞的方式

     群體培養(yǎng)（mass culture），將含有一定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，匯合（confluence）后形成均勻的單細(xì)胞層；

克隆培養(yǎng)（clonal culture），將高度稀釋的游離細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，各個(gè)細(xì)胞貼壁后，彼此距離較遠(yuǎn)，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)增殖每一個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞集落，稱(chēng)為克?。╟lone）。一個(gè)細(xì)胞克隆中的所有細(xì)胞均來(lái)源于同一個(gè)祖先細(xì)胞。